Bioprospección de productos naturales bioactivos para el desarrollo de una formulación tópica contra infecciones cutáneas graves

Abstract

Esta tesis doctoral investigó la composición química y la actividad biológica de extractos de corteza de especies arbóreas autóctonas del noroeste argentino: Alnus acuminata Kunth (Aliso), Polylepis australis Bitter (Queñoa), Anadenanthera colubrina Vell. Brenan (Cebil), Eucalyptus grandis W. Hill ex Maiden (Eucalipto) y Pinus sylvestris Linneo (Pino) para desarrollar una formulación tópica con potencial para el tratamiento de infecciones cutáneas. Se realizaron análisis anatómicos de las cortezas y se obtuvieron extractos acuosos y alcohólicos. Se llevó a cabo un análisis fitoquímico preliminar, se determinaron perfiles químicos por cromatografía en capa fina y se cuantificaron compuestos fenólicos totales, flavonoides y fenoles no flavonoides. La caracterización química se realizó mediante UHPLC-MS. Se evaluó la actividad antimicrobiana de los extractos frente a Staphylococcus aureus ATCC 25923 y una cepa clínica aislada de una infección cutánea, utilizando el método de microdilución en caldo. Además, se estudió la actividad antifúngica contra dos cepas clínicas de Candida albicans, una sensible (CaS) y otra resistente (CaR) a antifúngicos imidazólicos. La actividad antioxidante se determinó mediante tres ensayos: depuración de radical DPPH, inhibición de peroxidación lipídica y poder reductor. La toxicidad in vitro se evaluó empleando los ensayos de Artemia salina, semillas de Lactuca sativa y Allium cepa. Se formularon hidrogeles termosensibles incorporando los extractos más activos, y se realizó su caracterización reológica, evaluación antimicrobiana y estudio de irritabilidad mediante el método HET-CAM. Los resultados indicaron que los compuestos fenólicos no flavonoides fueron predominantes en todos los extractos y se identificaron por UHPLC-MS diarilheptanoides, glicósidos de compuestos fenólicos, ácidos fenólicos, diterpenoides, sesquiterpenoides, compuestos con estructura furánica y ésteres. El extracto acuoso de aliso presentó la mayor actividad antibacteriana, con concentraciones bactericidas mínimas de 250 µg/ml frente a la cepa clínica y 125 µg/ml frente a la cepa ATCC. En cuanto a la actividad antifúngica, el extracto alcohólico de eucalipto fue el más activo, con una concentración inhibitoria mínima de 250 µg/ml frente a ambas cepas. Los extractos de aliso, queñoa y cebil mostraron la mayor actividad antioxidante. La toxicidad RESUMEN Página | 2 in vitro fue baja en los ensayos de A. salina y L. sativa, aunque en A. cepa se observó un efecto genotóxico leve y dependiente de la concentración. La adición de los extractos a los hidrogeles no afectó la temperatura de gelificación. Las formulaciones con extracto alcohólico de cebil y extracto acuoso de aliso redujeron significativamente la carga bacteriana de S. aureus clínico. El hidrogel con extracto alcohólico de eucalipto mostró la mayor eficacia antifúngica, reduciendo el crecimiento de C. albicans resistente en un 75,8%. Ninguna de las formulaciones presentó efectos irritantes, lo que destaca su potencial seguridad para aplicaciones tópicas.