Estudio de bacterias lácticas autóctonas con características probióticas para producción porcina

Abstract

Las bacterias lácticas (BL) aisladas a partir de heces de cerdos en diferentes etapas de crecimiento y de raciones de alimentos fueron identificadas y caracterizadas a fin de seleccionarlas para ser utilizadas como probióticos. La población de BL varió de 7,10 a 9,40 log CFU/g en lechones en las etapas de crecimiento y lactancia, respectivamente. La diferenciación de cepas aisladas (230) se realizó mediante rep-PCR (secuencias repetitivas PCR) utilizando el primer (GTG)5 y análisis de secuencia parcial del ARNr 16S. Los principales géneros y especies de BL fueron Limosilactobacillus reuteri (49,2%), Pediococcus pentosaceus (20%), Lactobacillus amylovorus (11,4%) y Lactobacillus johnsonii (8,7%). Al caracterizar las BL identificadas, se realizaron ensayos in vitro, incluyendo las propiedades de superficie, tolerancia a las condiciones del tracto gastrointestinal (TGI) y producción de biofilm, exhibiendo diferentes características hidrofóbicas y agregantes, así como resistencia a ácido y sales biliares. Asimismo, algunos lactobacilos mostraron capacidad de degradación de almidón y fitato, así como actividad antagónica frente a patógenos Gram negativos y Gram positivos. Cuando se evaluó la resistencia/susceptibilidad a antibióticos, se observó elevada resistencia fenotípica a AMP, GEN, KAN, ERY, STR, TET y susceptibilidad a CLI y CHL. La caracterización genotípica mostró la presencia de 5 genes de resistencia; su presencia no se correlacionó en todos los casos con los rasgos fenotípicos. Los genes erm(B), strA, strB y aadE que confieren resistencia a ERY y STR fueron detectados en todos los lactobacilos analizados, mientras que el gen tet(M) fue detectado en las cepas de L. reuteri y L. amylovorus. La identificación y caracterización previamente realizada, permitió seleccionar preliminarmente a L. reuteri CRL2222, L. johnsonii CRL2229 y L. amylovorus CRL2225 como potenciales probióticos para cerdos. Se investigó la habilidad de estas cepas probióticas para interaccionar positivamente con células epiteliales intestinales porcinas (IPEC-J2) y se evaluó su capacidad antiinflamatoria frente a desafíos por ETEC F4. De los resultados puede inferirse que las BL probióticas reducirían la producción de citoquinas pro-inflamatorias mediante el bloqueo de las vías de señalización de NF-κB. Sin embargo, los bajos valores de expresión de estas citoquinas obtenidos en el ensayo, podrían sugerir un efecto de impedimento estérico y/o producción de ácido impidiendo la interacción de ETEC F4-células epiteliales porcinas y/o inhibición del patógeno. A fin de evaluar el efecto de los probióticos seleccionados en los cerdos, se administraron por vía oral (individual y en combinación) a cerdas en lactancia y lechones (lactantes y destetados) en un sistema de engorde intensivo (INTA Leales, Tucumán). En los ensayos se evaluaron variables relacionadas con parámetros nutricionales, hematológicos y microbiológicos. En conjunto, los resultados de la administración de probióticos (109 UFC/g/ml) durante las etapas más vulnerables de la cría de cerdos (lactancia/destete), mostraron un positivo impacto en la performance y salud de los animales. La formulación probiótica L. reuteri CRL222 + L. amylovorus CRL2225 + L. johnsonii CRL2229 administrada a lechones durante el destete exhibió los mejores resultados en la performance animal, confirmando el efecto sinérgico y/o aditivo de las actividades biológicas y funcionales de los probióticos. En conjunto, los resultados de este trabajo muestran que la suplementación dietaria con probióticos seleccionados ejerció efectos benéficos en la salud porcina con menores episodios de diarreas (probable mejor equilibrio de la microbiota intestinal), inmunidad y mayor performance durante la lactancia y destete.